比色法一般有bca，bradford，lowry几种：

　　★lowry法

　　以早期的biuret反应为基础，并有所改进。蛋白质与cu2反应，产生蓝色的反应物。但是与biuret相比，lowry法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂；反应需要的时间较长；容易受到非蛋白物质的影响；含edta，tritonx-100，ammoniasulfate等物质的蛋白不适合此种方法。

　　★bca法

　　一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与cu2反应产生cu，后者与bca形成螯合物，形成紫色化合物，吸收峰在562nm波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系强，反应后形成的化合物非常稳定。相对于lowry法，操作简单，敏感度高。但与lowry法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。

　　★bradford法

　　这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应，产生的有色化合物吸收峰595nm。其特点是敏感度好，是lowry和bca两种测试方法的2倍；操作更简单，速度更快；只需要一种反应试剂；化合物可以稳定1小时，方便结果；而且与一系列干扰lowry，bca反应的还原剂（如dtt，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的。主要缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。

　　以上几种方法到底该相信哪种？

　　由于各种方法反应的基团以及显色基团不一，所以同时使用几种方法对同一样品得出的样品浓度无可比性。即使测定同一样品，同一种比色法选择的标准样品不一致，测试后的浓度也不一致。因此在选择比色法之前，是参照要测试的样本的化学构成，寻找化学构成类似的标准蛋白作标准品。另外，比色法定量蛋白质，经常出现的问题是样品的吸光值太低，导致测出的样品浓度与实际的浓度差距较大。关键问题是，反应后超微量分光光度计的重要配件-比色杯的颜色有一定的半衰期，所以每种比色法都列出了反应测试时间，所有的样品（包括标准样品），都必须在此时间内测试。时间过长，得到的吸光值变小，换算的浓度值降低。除此，反应温度、溶液ph值等都是影响实验的重要原因。此外，非常重要的是，用塑料的比色法。避免使用石英或者玻璃材质的比色杯，因为反应后的颜色会让石英或者玻璃着色，导致样品吸光值不准确。

　　实验室确定细菌生长密度和生长期，多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验，需要采用超微量分光光度计准确测定细菌细胞密度。od600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液，之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作，必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数，做出校正曲线。实验中偶尔会出现菌液的od值出现负值，原因是采用了显色的培养基，即细菌培养一段时间后，与培养基反应，发生变色反应。另外，需注意的是，测试的样品不能离心，保持细菌悬浮状态。